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培养基配制流程和注意要点

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培养基配制流程和注意要点

发布日期:2021-09-24 作者: 点击:

今天培养基厂家凯林贸易跟大家具体聊聊培养基配制流程和注意要点


培养基配制程序如下∶

1.将贮存的各种母液按顺序依次放好。

2将各种洁净的玻璃器皿如培养瓶、量筒、烧杯、吸管、玻璃棒、漏斗等,放在指定的位置。准备好蒸馏水或无离子水及瓶盖或封口膜、包纸、橡皮筋等。

3.称取规定量的琼脂和蔗糖,将琼脂置于精钢锅或者电饭煲中,加水至培养基最终容积的3/4或1/2,随之加热使之溶解,注意防止湖锅底和溢出。琼脂必须完全溶化,以免造成浓度不均。

琼脂不能过多,不然会导致培养基太硬,含水太少,通气不良;反之,培养基太软,植物材料则难以固定。由于琼脂较难溶解,所以在制备培养基时,应首先加热溶解。


培养基厂家

4.按母液顺序,根据不同母液的浓缩倍数移取规定的量,如配制1LMS培养基移取浓缩10倍的大量元素母液为100mL。母液加完后,再经过计算加入所需要的植物生长调节剂。

在加入母液或生长调节剂时,应事先检查这些药品是否已经变色或产生沉淀,若出现这些现象就停止使用。加完后一并倒入已溶化的琼脂中,并再加入蔗糖。

5.加蒸馏水定容至培养基的最终容积。

6. pH值调整。培养基的pH值(酸碱度)直接影响培养物对离子的吸收,所以过酸或过碱都会影响植物的生长。此外,琼脂培养基的pH值还影响到其凝固程度,所以当培养基配制好以后,应随即进行pH值的调整(一般pH值为5.6-6.0)。

建议是用酸度计测试,即快又准,如无此设备也可以用精密pH试纸(应在干燥容器中保存,以免吸潮而失效)。若培养基偏酸就用1mol/L的氢氧化钠来调节,偏碱则用1mol/L的盐酸来调节。

经高压蒸汽灭菌后,由于某些成分的分解(如蔗糖)或氧化,使培养基的pH值会降低(一般会降低0.2左右)。有时玻璃皿质量较差,其中一部分物质溶解,也会影响酸度的变化,这些再调整培养基的pH值的时候都要考虑进去。

一般在比较成熟的情况下,会在培养基高压蒸汽灭菌前调高一定的pH值,以便适应灭菌后pH值下降的问题,具体调高多少可根据自身实验摸索。

7.培养基的分装。琼脂约在40°℃以下时凝固,因此配制好的培养基要趁热分装,分装时一般用烧杯、漏斗直接精选分注。若条件允许,用培养基灌装机来分注会更加方便。

分装时要掌握好分注量,多了即浪费又减小培养物的生长空间;少了又会因营养不足而影响生长,一般以占培养容器1/4- 1/3左右为宜,培养基在培养容器中的厚度约为1.5cm。

分装时要注意不要将培养基沾到管壁上,以免引起污染。分装后立即塞上棉塞或者盖上瓶盖或封好封口膜,并在培养瓶上贴标签或用记号笔在瓶壁上作好标注,然后进行灭菌。


培养基配制流程图如下:


培养基配制流程


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关键词:培养基配制,凯林贸易,培养基厂家

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