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培养基的制备

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培养基的制备

发布日期:2022-06-24 作者: 点击:

培养基用水

培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水,最好不使用离子交换器生产的去离子水.

 

称量

称量时要用专用的角匙,避免交叉污染而影响检验结果;干粉培养基易吸潮,如有条件,尽量在湿度较低的房间称取培养基.

 

培养基厂家



复水

复水时不得用铜锅或铁锅,以防有离子混入培养基中,影响微生物的生长;容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上,避免在加热溶解过程中,培养基溢出;含有琼脂粉的培养基,在加热溶解之前可以浸泡数分钟;加热培养基时一定要进行搅拌,特别是琼脂类培养基.为避免烧焦和沸腾溢出,对于少量的培养基最好使用沸水浴进行加热.烧糊的培养基营养物质被破坏,并可产生有毒物质,如发现焦化,或未溶解均匀前培养基有溢出,该培养基即不能使用,应重新制备.

 

灭菌

一般培养基采用湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌,通常是121摄氏度15 分钟,含糖或特殊培养基,按照国家标准或生产商提供的说明灭菌.已配制好的培养基必须立即灭菌,避免微生物生长繁殖而消耗养分,改变培养基的酸碱度.高温可破坏培养基的营养成分,还会使琼脂的凝胶强度下降,因此必须严格控制灭菌温度和时间,并且不可重复灭菌.高压蒸汽灭菌锅的压力表等要定期进行检定,并定期采用生物指示菌法或化学变色纸片对灭菌效果进行验证.


pH测定

微生物必须在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性.培养基配方要求的pH为灭菌或消毒后的pH值,即培养基使用前的pH,并应在25摄氏度温度下采用精密酸度计进行测量,固体琼脂培养基应以特殊的胶体表面测量电极进行测量.使用过程中,如果需要调整培养基的pH,应用1mol/L Na0H或lmol/L HCL调整,注意不可反复调pH,否则会影响培养基的渗透压.

 


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