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传统的微生物检测方法,主要有:划线、涂布和倾注。直接将样品置于培养基上或培养基中进行培养观察。
划线法适合做阳性菌接种,同时适合对单一菌落进行分离且聚落形态呈线性生长,但划线法的操作难度大,容易将琼脂划破,而且不同菌落使用不同接种环,容易交叉污染。
涂布法是一种简单快捷、可用于固体等不可过滤样品、适合广泛的选择性琼脂传统的微生物检测方法 但它存在技术不准确、样品体积有限、无法除去抑制剂等缺点。
倾注法与涂布法相似,优点是简单快速,适合广泛的选择性琼脂,可用于固体等不可过滤样品,缺点是样品体积有限,无法除去抑制剂,无法观察到典型菌落形态,技术不准确,容易连片。
MNP法(最大可能数法)也称稀释培养计数,制备三个连续稀释级供试液,每一稀释级取三份一毫升分别接种至三管液体培养基中,培养后观察是否有微生物生长,根据微生物生长的管数从表中查需氧菌总数的最可能数。
优点:传统方法,广泛的选择性液体培养基,用于不同性状类型的产品
缺点:,工作量大,多步稀释和操作,额外的准备和清洁时间,无法计数(微生物的可能数量),需要附加实验确认
薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于零点四五pm(该孔径可以有效截留百分之九十以上的微生物),直径一般为五十mm。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。使用时,应保证滤膜在过滤前后的完整性。应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面,从而使滤膜发挥最大过滤效率。
优点:可将抑菌物质冲洗掉,可测试大体积样品,统计学意义上更可靠,敏感度高,可达一CFU
缺点:只适用可过滤样品,固体颗粒可能会堵膜
总结:根据不同的样品选择合适的方法检测,能够更加客观的反映样品中微生物的含量,从而制定相应的内控参数以符合样品放行的标准。
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